Размножение растений in vitro

Множество писем по поводу возможности клонирования в квартирных условиях заставили меня написать эту статью.
Да, теоретически это возможно.
(Мы, конечно же, имеем для этого спецоборудование.)
Данная статья рассчитана на простых людей, не имеющих спецобразования,
поэтому писать буду простым языком, без применения специальных терминов.
Научных работников лабораторий по размножению in vitro прошу отнестись к ней лояльно.
Прежде всего, разберемся во всех плюсах и минусах микроклонального размножения.
Минусы:
Качественный процесс, если соблюдать все правила, - очень дорогое удовольствие.
Поэтому, выгодно это только в очень большом количестве - десятки тысяч и более.
Мало кто в нашей стране в это хочет вкладывать десятки тысяч долларов.
Именно поэтому, мы имеем дело часто с некачественным посадочным материалом. Растения плохо переносят адаптацию, химеры спортуют, и т.д. При размножении же традиционным способом, слабые растения просто погибают, а выживают сильнейшие.
Плюсы:
При соблюдении всех тонкостей, при микроклональном размножении можно получать любое количество одинаково очень качественного посадочного материала, что не возможно при традиционном размножении. В дальнейшем после адаптации, качественно клонированные растения опережают в своем развитии своих братьев, выращенных традиционным способом.
Если у Вас есть свободное время и желание попробовать, то я опишу первый, на мой взгляд, самый главный этап этого процесса. Клонировать будем фаленопсис. Так как питательная среда содержит все необходимое для размножения не только нужной для нас культуры, но и для всевозможных грибков, бактерий, летающих в воздухе и находящихся на самом растении, нужно пройти этап получения стерильной культуры.
Как только Вы получите стерильный, жизнеспособный материал, дальше множить его - дело техники.
Для начала, Вы должны найти подходящее помещение. Например, подойдет ванная комната, облицованная кафельной плиткой. Моете ее всю с применением дезинфицирующего средства. Предварительно покупаете в медтехнике кварцевую лампу 400вт.(50-100гривен), подключаете ее к обыкновенному дросселю(40-80грн.) Кварцуете комнату 2- 4 часа. Покупаете ватно-марлевую повязку, халат, шапочку. Проглаживаете все эти вещи и вешаете в комнате перед кварцеванием. Все вспомогательные вещи, кроме, конечно, растений, заносятся в комнату перед кварцеванием. Любая малейшая пылинка, попавшая в стерильную пробирку с питательной смесью, вырастет в большую плесень. Поэтому хочу обратить Ваше внимание на ответственность этого этапа. Естественно, нужно заклеить все вентиляционные отверстия. Далее Вам понадобятся пинцет, скальпель, стерильные салфетки (их должно быть не менее 10), на которых вы будете подрезать цветоносы. Пустые банки, фольга, инструменты стерилизуются в духовке при температуре не ниже 200 градусов 2 часа. В качестве салфеток подойдут льняные лоскутки размером 20 на 20 см. Заворачиваете в пищевую фольгу, все по отдельности, и прожигаете в духовке при температуре 150 градусов 3 часа (подберите сами максимальную температуру, чтобы они не сгорели).
Покупаете в аптеке дистиллированную воду, разливаете в предварительно стерилизованные в духовке 200 граммовые банки. Закрываете банки прожженной фольгой и стерилизуете, можно в духовке, скороварке, микроволновке (фольгу заменить бумагой). Далее готовите стерилизационный раствор. Подойдет обыкновенная хлорка. Разводите ее 10гр на 100 мл дистиллированной воды. Моете цветоносы в проточной воде с хозяйственным мылом.
Вот минимум предварительных работ.
Выключаете кварцевую лампу (обгореть можно за 10 минут), заходите в комнату, заносите цветоносы, переодеваетесь (надеваете халат, шапочку, ватно-марлевую повязку), протираете руки и стол, на котором будете работать, спиртом. Никаких резких движений.
Расставляете перед собой банку со стерилизующим раствором и три банки со стерилизованным дистиллятом. Опускаете цветоносы в первую банку. Вынимаете стерильным пинцетом первый цветонос через 6 минут, второй через 8 и т.д., последний через 20 минут. Опускаете сразу после первой банки в дистиллят. Вымачиваете цветоносы 10 минут. Пинцет и скальпель стерилизуете в пламени спиртовки и даете им остыть перед каждым последующем использованием. Опускаете цветоносы в следующую банку с дистиллятом. Затем, также в третью. Это необходимо для удаления остатков хлорки. Разворачиваете фольгу с салфетками и кладете на нее один цветонос. Обрезаете цветонос прожженным скальпелем. Оставляете внизу под спящей почкой 5мм., выше - 3 мм. Открываете пробирку с питательной смесью (покупаете у меня - 2 гривны штука), сажаете туда цветонос, чтобы спящие почки были над поверхностью, закрываете фольгой. И так далее с каждым цветоносом, меняя салфетки и стерилизуя инструменты. ВСЕ.
Ставите пробирки с цветоносами на полки. Температура 25-28 градусов. Продолжительность светового дня примерно 16 часов. Влажность 70%. Если в пробирках через две недели не поросло плесенью, то Вы достерилизовали. Если через месяц (максимум 1,5 месяца) почки не проснулись, то Вы перестерилизовали. Из спящих почек, при соблюдении температурного режима, вырастут несколько маленьких розеток, которые в дальнейшем Вы и будете клонировать.
Ну как, Вам еще хочется попробовать этим заняться?
Если Вы осилите этот этап, то следующие тем более.